用于评估不同脂质纳米胶囊肠道吸收的新型体外共蜂窝模型

用于评估纳米颗粒如Caco-2的吸收的标准模型忽略了血管内皮的存在,这是肠道多层阻挡结构的一部分。因此,在Transwell上的Caco-2上皮和HMEC-1(人微血管内皮细胞1)之间的共蜂巢®镶件已研制成功。

该模型已被透射电子显微镜(TEM)验证(A)膜形态;(b)免疫测定的ZO-1和β-连环蛋白表达;(c)通过跨上皮电阻(TEER)测量的膜完整性;(d)来自不同生物制药分类系统(BCS)课程的药物的表观渗透性。用不同尺寸(55和85nm)和表面改性(DSPE-MPEG(2000)和硬脂胺)配制脂纳米胶囊(LNC)。使用Förster共振能量转移(FRET)技术监测纳米胶囊完整性和颗粒浓度。

结果表明,DSPE-MPEG(2000)的表面改性增加了共培养模型中的55-Nm LNC,但不在Caco-2中增加。总而言之,共有植物模型被验证为评估药物和纳米颗粒的肠道吸收的工具。新的共培养模型具有不同的LNC吸收机制,表明肠内皮的重要性,并揭示了LNC的表面改性可以改变体外的口腔吸收。

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文章信息:Kaeokhamloed,n;罗杰,e .;Béjaud,j;Lautram,n .;Manero,F .;perrot,r。Abbara,C。;Breiet,M;Legeay,S。评估不同脂质纳米胶囊的肠道吸收的新型体外共蜂窝模型。制药学202113., 595年。https://doi.org/10.3390/pharmaceutics13050595

材料:Caco-2和HMEC-1细胞是从美国型文化收集(Manassas,VA,USA)获得的。氯化钠,四苯甲酸钠,乙酸乙酯,二氯甲烷,甲醇,Triton X-100,Trizma®(碱基),抗β-catenin兔单抗,抗tjp1(紧密连接蛋白-1;4 ',6-二氨基-2-苯吲哚(DAPI), Dulbecco ' s修饰Eagle ' s培养基(DMEM D6429, 4500 mg/L葡萄糖,L.- 谷氨酰胺,丙酮酸钠和碳酸氢钠),二甲基亚甲醚(DMSO),表皮生长因子,氢化胞苷HCL粉末注射,锇氧化锇(OSO4.)、Epon™812树脂、酒石酸美托洛尔、盐酸普萘洛尔、萘普生、阿替洛尔和呋塞米以及硬脂胺购自Sigma-Aldrich (Saint-Quentin Fallavier, France)。汉克平衡盐溶液(HBSS), MCDB 131培养基(Gibco 10372-019),青霉素-链霉素溶液,山羊抗兔IgG Alexa面粉®488,DII(1,10-二酰基-3,3,30,30-四甲基 - 吲哚菁高氯酸盐),并使其(1,1'-二辛酰基-3,3,3,3',3'-四甲基吲哚 - 二碳键氰酸盐)是高氯酸盐)从Thermofisher(Villebon-sur-Yvette,法国)购买。两性霉素B,磷酸盐缓冲盐水(PBS),和L.-Glutamine购自Paa Laboratories(加拿大多伦多)。胎儿牛血清(FBS)购自BioWest(法国Nuaillé)。甲甲甲醛32%和戊二醛25%购自电子显微科学(Hatfield,Pa,USA)。非校准氨基酸(NEAA)购自Lonza(比利时Verviers)。从毫到Q中获得超纯水®A10系统(默克密理博达姆施塔特,德国)。配角®Transwell®(12孔,聚碳酸酯膜过滤器,0.4µm孔径,1.12 cm2生长区域)和T75细胞培养烧瓶是从Costar(纽约,纽约,美国)购买的。Captex.®Abitec Corporation(俄亥俄州哥伦布)提供8000(Glyceryl Tricaprylate)。Lipoid.®S75-3(磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺混合物)购自Lipoid GmbH.(瑞士Steinhausen);kolliphor.®HS-15(PEG 660和聚乙二醇660羟基二醇混合物)来自巴斯夫(Ludwigshafen,德国);和dspe-mpeg(2000)(1,2- distearoyl-sn-甘油-3-磷乙醇胺 -N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](铵盐))Avanti极性脂(雪花石膏,AL,美国)。

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