辅料对蛋白a层析及病毒灭活的影响

单克隆抗体和Fc融合蛋白的纯化由几个单元操作组成,通常作为一个平台操作,从蛋白a层析开始。第一个捕获步骤,随后的低pH病毒灭活,以及随后的离子交换色谱步骤大多能够去除任何杂质,如宿主细胞蛋白质、聚集体和病毒。在这些步骤中,pH值和电导率的变化会导致额外的不需要的产品种类,如聚集体。

集锦

PEG4000可减少蛋白A色谱中单抗洗脱时的峰前沿。
PEG调节线性pH梯度洗脱提高宿主细胞蛋白去除率。
通过添加多元醇和糖,可以减少低pH保持步骤中的聚集。
赋形剂不损害病毒灭活或与CEX结合。

本研究以具有稳定功能的赋形剂,如多元醇,作为缓冲体系添加剂,研究其对蛋白质A层析、低pH病毒灭活、阳离子交换层析等方面的影响。结果表明,辅料,如2012年欧洲杯投注门 4000,影响抗体洗脱行为,以及在pH梯度设置中宿主细胞蛋白质洗脱行为。

糖类赋形剂,如蔗糖,在低pH病毒灭活过程中稳定抗体。所有受试赋形剂在随后的阳离子交换层析步骤中对病毒灭活和动态结合能力没有负面影响。这项研究表明,赋形剂和可能的赋形剂组合可以在不损害后续下游加工步骤的情况下对纯化产生有益的影响。继续阅读这里

文章信息:Carolin Stange,Supriyadi Hafiz,Christoph Korpus,Romas Skudas,Christian Frech,赋形剂对蛋白质a层析和病毒灭活的影响,层析杂志B,2021,122848,https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2021.122848

你可能还喜欢