Carboxymethyl-β-葡聚糖/壳聚糖纳米粒子:用于抗原输送的新型恒温和高效载体

在过去的几十年里,纳米技术已经成为一种重要的工具,旨在增强对现代抗原的免疫反应。专门为此目的设计的纳米载体已被证明对蛋白质、多肽和多核苷酸抗原提供保护、稳定性和控释性。多糖是构建这些纳米载体的特别有趣的生物材料,因为它们广泛分布在病原体中,有助于抗原呈递细胞(APCs)识别它们。本研究以免疫兴奋剂β-葡聚糖衍生物羧甲基-β-葡聚糖为研究对象,制备了一种新型的壳聚糖纳米载体。

由此产生的羧甲基-β葡聚糖/壳聚糖以卵清蛋白为模型化合物,纳米粒子表现出足够的物理化学性质和重要的蛋白质结合效率。此外,通过优化载抗原纳米颗粒的冻干形式,获得了热稳定性,在40ºC下可保持稳定达1个月。在小鼠体内的生物分布研究表明,在皮下注射后,纳米颗粒可有效地引流到最近的淋巴结,并与树突状细胞显著共定位。此外,小鼠皮下注射单剂量载卵清蛋白纳米颗粒可诱导T细胞增殖和抗体反应,与铝吸附卵清蛋白的效果相当。这些结果说明了这些新型纳米载体在疫苗接种中的潜力。

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Cordeiro, a.s., Farsakoglu, Y., Crecente-Campo, J.。et al。羧甲基-β-葡聚糖/壳聚糖纳米粒子:用于抗原递送的新型恒温和有效载体。毒品混合。并翻译。res。(2021)。https://doi.org/10.1007/S13346-021-00968-9.

材料

医药级壳聚糖Heppe Medical Chitosan GmbH(Halle,Germany)中获得了盐酸分子量为47kDa和80-95%的脱乙酰化程度。羧甲基-β-葡聚糖,得到的酿酒酵母酿酒酵母并以85%的替代度与羧甲基进行修饰,是来自Mibelle Ag生物化学(Buchs,瑞士)的含良好捐赠。卵磷蛋白,以分子量为45kDa的完全蛋白质的形式,由InvivoLON(Froulouse)提供。从EMP Biotech GmbH(德国柏林)收购了5-羧甲特四甲基 - 罗丹明琥珀酰亚胺酯(5-Tamra SE)。蔗糖Dilakee(Surfhope®D1216)从三菱化学食品公司(日本东京)获得。蔗糖从Acofarma(西班牙马德里)购买,海藻糖(医药级)从pfanstiehl.(沃基根(IL),美国)。聚乙烯吡咯烷酮(PVP,科利当®25)购自巴斯夫(德国路德维希港)。从Merck Millipore (Darmstadt, Germany)收购角鲨烯。失水山梨醇油酸酯(跨度®80)、牛血清白蛋白和甘氨酸均来自Sigma-Aldrich(圣路易斯,美国)。所有溶剂均为HPLC级,由Thermo Fisher Scientific(美国沃尔瑟姆)或Scharlab SL(西班牙巴塞罗那)提供。

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